如何克隆一个自己？7 年分子克隆经验手把手教你

文末可领取免费科研入门教学资源首先克隆是什么？目的基因与载体的连接及其后续的转化过程习惯上称为克隆 (cloning），也就是说，在体外将 DNA 分子片段与载体 DNA 片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中 DNA 分子克隆（或基因克隆）。那如何能成功的克隆出自己？必要条件是什么？DNA 片段的克隆需要合适的载体（*载体是指运载外源 DNA 有效进入受体细胞内的工具），载体可以是质粒、噬菌体或者病毒，通常经过人工改造。获得目的基因后必须将其放在一定的载体内才能在宿主细胞内扩增或表达。作为载体必须具备两条件：一是该载体在细胞内必须能自主复制，即必须具备复制原点；二是该载体必须具备适合的酶切位点，且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条，保证了载体的可繁殖性和可利用性。为了便于克隆，载体上常有筛选标记，如对抗菌素的抗性，某些基因产物的显色反应等。分子克隆的常用载体有：1. 质粒，常用的有 pBR322、pUC 系列质粒等2. 单链丝状噬菌体和噬粒教学视频为了更详细的介绍克隆，我们贴心地为大家准备了两个视频，更细致地讲解克隆：经验分享👉四步致胜奇招 高效克隆你值得拥有（上）👉四步致胜奇招 高效克隆你值得拥有（下）👉SiRNA实验十大秘诀由于目前很多基因都是利用 PCR 技术获得，因此这里简单介绍 PCR 产物的克隆策略：作为克隆的第一步就是要获得 PCR 产物。无论研究的起始材料是 RNA 还是 DNA ，最重要的是要有一种有效的方法对 PCR 产物进行克隆。目前已建立了多种对 PCR 产物进行克隆的方法，具体选择哪种方法取决于以下几个因素：1. PCR 产物序列是否已知；2. 载体上有哪些单一的限制性酶切位点可以利用；3. 克隆 PCR 产物的用途等。掌握了理论知识之后，下面就是操作干货以及方法汇总：还有什么克隆相关的问题吗？快来丁香实验寻找答案吧👇👇👇策划｜蛋黄排版｜77图片｜丁香实验设计团队

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王凯